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              內毒素ELISA檢測試劑盒試驗步驟
            1. 發布日期:2019-02-25      瀏覽次數:564
              •    內毒素ELISA檢測試劑盒檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,這個方法用于檢測特異性IgG,IgA盒IgM。這個方法的步是因相捕獲的抗體是否是特異抗原的抗體。間接elisa在家側IgG時比較簡單,但不適用于檢測其他種類的抗體。

                內毒素ELISA檢測試劑盒



                  內毒素ELISA檢測試劑盒試驗步驟:
                  1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
                  2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
                  3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
                  4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
                  5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
                  6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
                  7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
                  8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
                 
                  內毒素ELISA檢測試劑盒試驗注意事項:
                  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
                  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
                  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間一般控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。
                  4.請每次測定的同時做標準曲線,一般做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
                  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                  6.底物請避光保存。
                  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
                  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
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