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              蘄蛇LAMP鑒定試劑盒說明書

              產品時間:2021-02-26

              簡要描述:

              蘄蛇LAMP鑒定試劑盒說明書使用及效果:將本產品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(PCR 參數由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。

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              儲存條件:
              14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
              1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
              2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
              3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
              4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
              5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

              產品名稱蘄蛇LAMP鑒定試劑盒說明書
              英文名稱Agkistrodon
              貨號BH-P98741

              特點:
              1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
              2. 根據地黃保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
              3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
              4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
              5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
              6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

              使用方法:
              一、樣品采集:
              1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照《食品衛生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
              2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
              3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
              4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
              一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
              1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
              2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
              3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
              4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
              5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
              6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
              7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
               注:上述樣品建議經過增菌后,收集培養物用于檢測。
              二、DNA提?。?br />可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業化產品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
              1、液體培養物:取液體培養物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
              2、固體培養物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
              3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
              4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
               注:陽性對照和陰性對照為已經抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區域加入陽性對照。

              Acetyl CoA Carboxylase  乙酰羧化酶抗體  0.2ml
              Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)  磷酸化乙酰羧化酶抗體  0.1ml
              ACD  腎上腺皮質發育異常蛋白抗體  0.2ml
              ACHE/Acetylcholinesterase  乙酰酶抗體  0.1ml
              Acinus  Acinus抗體  0.2ml
              phospho-Acinus(Ser1180)  磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體  0.1ml
              Ack1  醋酸激酶1抗體  0.2ml
              Phospho-Ack1(Tyr859/860)  磷酸化Ack1抗體  0.1ml
              Phospho-Ack1(Tyr284)  磷酸化Ack1抗體  0.1ml
              Phospho-Ack1(Tyr326)  磷酸化Ack1抗體  0.1ml
              ACSL1  長鏈脂肪酸連接酶1/2抗體  0.2ml
              ACTH (1-39)  促腎上腺皮質激素(1-39)抗體  0.1ml
              Phospho-MKP1 (Ser318)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體  0.1ml
              ACTH (18-39)  促腎上腺皮質激素ACTH(18-39)抗體  0.1ml
              ACTH (7-23)  促腎上腺皮質激素ACTH (7-23)抗體  0.1ml
              Actin α/alpha-SMA  肌動蛋白α(α-SMA)抗體  0.1ml
              Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體  0.1ml
              alpha Actinin 4  α-輔肌動蛋白4抗體  0.2ml
              F-Actin  纖維狀肌動蛋白抗體  0.1ml
              ACOT8  ?;蝓ッ?  0.2ml
              Agpat2  溶血磷脂酸?;D移酶β抗體  0.2ml
              AGPAT4  溶血磷脂酸?;D移酶D抗體  0.2ml

              LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit  人瘦素受體  96T
              AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體2  96T
              ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體1  96T
              ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit  人血管生成素4  96T
              sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit  人可溶性肌球蛋白重鏈1  96T
              HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  人熱休克因子1  96T
              VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit  人血管活性肽酶抑制劑  96T
              CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit  人心肌肌凝蛋白輕鏈1  96T
              IMA(Human Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit  人缺血修飾白蛋白  96T
              8-epi-PGF2 Alpha(Human 8-epi-prostaglandin F2alpha0 ELISA Kit  人8-異構前列腺素F2α  96T
              sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit  人血管內皮鈣粘著蛋白復合體  96T
              Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit  人α平滑肌肌動蛋白  96T
              Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit  人α橫紋肌肌動蛋白  96T
              SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit  人平滑肌肌球蛋白  96T
              cTnT(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  人心肌特異性肌鈣蛋白T  96T
              MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit  人肌球蛋白重鏈  96T
              HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit  人熱休克蛋白27  96T
              ANG(Human angiostatin) ELISA Kit  人血管抑素/血管穩定蛋白  96T
              h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit  人心型脂肪酸結合蛋白  96T
              b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit  人腦型脂肪酸結合蛋白  96T
              BK(Human Bradykinin) ELISA Kit  人血管舒緩激肽  96T
              MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit  人肌球蛋白輕鏈  96T
              ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit  人α-輔肌動蛋白3  96T
              hs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反應蛋白  96T
              Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌鈣蛋白Ⅰ  96T
              SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A  96T
              Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60  96T
              HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96  96T
              CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌營養素1  96T
              CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人銅藍蛋白  96T
              HSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人熱休克蛋白90  96T
              HSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人熱休克蛋白70  96T
              HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  人熱休克蛋白40  96T
              HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit  人熱休克蛋白20  96T
              MYS(Human Myosin) ELISA Kit  人肌球蛋白  96T
              GS(Human Gelsolin) ELISA Kit  人凝溶膠蛋白  96T
              蘄蛇LAMP鑒定試劑盒說明書CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit  人C反應蛋白  96T
              ALD(Human aldosterone) ELISA Kit  人醛固酮  96T
              MYO/MB(Human Myoglobin) ELISA Kit  人肌紅蛋白  96T
              實驗流程:
              1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
              2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
              3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
              4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
              5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
              6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
              7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
              8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
              9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

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